人类感染结核分枝杆菌后，产生免疫力的同时也会发生迟发型超敏反应。将一定量的结核菌素注入皮内，如受试者曾感染结核分枝杆菌，则在注射部位出现迟发型超敏反应炎症，判为阳性，未感染结核分枝杆菌的则为阴性。此法可用于检测可疑患者曾否感染过结核分枝杆菌，接种卡介苗后是否阳转以及检测机体细胞免疫功能。
结核菌素试剂有两种，一种为旧结核菌素（OT），为含有结核分枝杆菌的甘油肉汤培养物加热过滤液，主要成分是结核蛋白，也含有结核分枝杆菌生长过程中产生的其他代谢产物和培养基成分。另一种为纯蛋白衍生物（PPD），是OT经三氯醋酸沉淀后的纯化物：PPD有两种，即PPDC和BCGPPD，前者由人结核分枝杆菌提取，后者由卡介苗制成，每0.1ml含5单位。
2方法目前多采用PPD法。规范试验方法是取PPDC和BCGPPD各5单位分别注入受试者两前臂掌侧皮内（目前仍有沿用单侧注射PPD的方法），48~72小时后，红肿硬结小于5mm者为阴性反应；超过5mm者为阳性；≥15mm者为强阳性。两侧红肿中，若PPDC侧大于BCGPPD侧时为感染，反之则可能为接种卡介苗所g致。
3结果分析阳性反应表明机体已感染过结核分枝杆菌或卡介苗接种成功，对结核分枝杆菌有迟发型超敏反应，并说明有特异性免疫力。强阳性反应则表明可能有活动性结核病，尤其是婴儿。阴性反应表明受试者可能未感染过结核分枝杆菌或正患严重的结核病如全身粟粒性结核和结核性脑膜炎时机体无反应能力，或患其他严重疾病致细胞免疫功能低下者（如艾滋病患者、肿瘤患者或用过免疫抑制剂者）也可能出现阴性反应。
4应用结核菌素试验可用于：
①诊断婴幼儿的结核病；
②测定接种卡介苗后免疫效果；
③在未接种卡介苗的人群中进行结核分枝杆菌的流行病学调查；
④用于测定肿瘤患者的细胞免疫功能。
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